二維液相色譜(2DLC)就是將分離機(jī)理不同但又相互獨(dú)立的兩支色譜柱串聯(lián)起來(lái)構(gòu)成的分離系統(tǒng)。樣品首先經(jīng)過(guò)di一維的色譜柱進(jìn)入接口，通過(guò)濃縮、富集或切割后被切換進(jìn)入到第二維色譜柱和檢測(cè)器。
二維分離采用兩種不同的分離機(jī)理分離樣品，即利用樣品的兩種不同特性把復(fù)雜混合物分離成單一組分，這些特性包括極性差別、分子量、基團(tuán)差別、空間構(gòu)形、酸堿性等，將具有不同分離效果的色譜分離模式進(jìn)行組合，使復(fù)雜體系的樣品在一維系統(tǒng)中不能*分離的組分可能在二維系統(tǒng)中得到更好的分離，與一維系統(tǒng)相比，分辨率和分離能力都能得到很大的提高。
根據(jù)di一維餾分是否直接轉(zhuǎn)移到第二維，可把二維色譜分為離線(off-line)和在線(on-1ine)兩種模式，離線模式對(duì)儀器的要求相對(duì)低，但是操作起來(lái)耗時(shí)耗力，難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化和重復(fù)性，并且在樣品處理過(guò)程中由于人為操作容易產(chǎn)生樣品的損失和污染。在線模式操作快，重復(fù)性好，可以避免人為誤差，提高樣品分析速率，具有更高的分離效率，但是對(duì)儀器設(shè)備的要求較高。
按照di一維的餾分是否全部進(jìn)入第二維，又可將其分為中心切割(heartcutting)二維液相色譜和全二維(comprehensive)液相色譜，前者是將di一維色譜柱分離出的某個(gè)或者某些目標(biāo)組分轉(zhuǎn)移到第二維進(jìn)行繼續(xù)分析，適合目標(biāo)組分的分析；后者是將di一維的餾分全部進(jìn)入到第二維進(jìn)行分離，主要通過(guò)在線二維液相色譜來(lái)實(shí)現(xiàn)。
基于不同的分離目的，可以采用不同分離機(jī)理來(lái)構(gòu)建二維液相色譜分離系統(tǒng)，例如，反相色譜(RPLC)、正相色譜(NP)、離子交換色譜(IEX)、親和色譜(AC)、尺寸排阻色譜(sEc)等分離模式。
我們常用反相色譜與正相色譜，而親水色譜(HILIC)是被認(rèn)為是正相色譜(NP)的替代選擇，HILIC模式使用的梯度和反相模式相反。初始條件包括高比例有機(jī)相，典型的濃度是95%有機(jī)相如乙腈或甲醇，然后逐步降低到水相。
